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研究背景:子痫前期(preeclampsia,PE)是一种常见的孕妇多系统功能紊乱综合征,以孕20周后出现高血压、蛋白尿为主要临床表现,是危害孕产妇和新生儿生命健康的主要疾病之一。早期诊断和预测,是相关领域面临的重大课题。在前期研究中,课题组应用q RT-PCR技术,检测妊娠期母体血清mi Rs,结果发现,在11种被检物质中,PE患者孕早期血清mi R-520g显著高于正常孕妇,提示:mi R-520g可能与PE的发生相关,亟待证实。本课题主要研究:妊娠期母体血清mi R-520g变化规律及其与子痫前期发生的关系,探讨其作用机制。方法:1.建立PE生物样本库,全程收集孕妇产检血标本。2.应用定量RT-PCR技术检测各孕期血清中mi R-520g含量。3.通过原位杂交技术观察mi R-520g在胎盘滋养细胞和内皮细胞的分布情况。4.ELISA法检测细胞培养上清液及孕早期(5-12周)血浆中MMP2、VEGFA水平。5.采用免疫组织化学技术观察MMP2、VEGF、Eprin B2和EPHB4在胎盘滋养细胞、内皮细胞的分布情况。6.利用mi R-520g mimic和inhibitor建立绒毛外滋养细胞、子宫微血管内皮细胞干预模型,研究mi R-520g对两种细胞生物学行为的影响及可能的机制,探讨其在子宫螺旋动脉重塑中的作用。结果:1.随孕程进展,血清mi R-520g的表达量增加;孕早期,子痫前期组血清mi R-520g显著高于对照组,孕中、晚期血清mi R-520g表达量与对照组没有显著差异。2.孕早期子痫前期患者血浆中MMP2浓度高于正常孕妇(225.0411±34.21961 VS.203.5094±24.47596 ng/ml),差异具有显著性(p=0.04);两组血浆中VEGFA浓度无显著差异(p=0.717)。3.mi R-520g主要分布于滋养细胞胞浆。在内皮细胞和间质细胞不表达。4.MMP2主要存在于合体滋养细胞胞浆中;VEGFA、Ephrin B2广泛存在于滋养细胞、血管内皮细胞及间质细胞中;EPHB4在细胞滋养细胞膜强表达,在合体滋养细胞弱表达。5.与对照组相比,mi R-520g mimic和inhibitor转染后HTR8/SVneo、HUt MEC内MMP2、VEGFA、Ephrin B2、EPHB4 m RNA浓度无明显变化。6.与对照组相比,mi R-520g mimic和inhibitor转染HTR8/SVneo后,VEGF、MMP2的表达降低,EPHB4蛋白浓度无显著变化,HTR8/SVneo不表达Ephrin B2;转染HUt MEC后,VEGF、MMP2、Ephrin B2、EPHB4蛋白浓度均无显著变化。7.mi R-520g mimic能够抑制HTR8/SVneo迁移、侵袭,促进其凋亡,对HUt MEC生物学行为无明显影响。结论:1.孕早期母体血清中mi R-520g可能是子痫前期发生的预测指标。2.mi R-520g可能通过促进滋养细胞凋亡、抑制MMP2和VEGFA的生成进而抑制滋养细胞迁移和侵袭的方式影响Sp A重塑,推测mi R-520g可能参与PE的病理生理过程。