【摘 要】
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目的:探究吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinine, PQQ)对中波紫外线(ultraviolet B, UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞早衰的影响。方法:采用不同浓度(10、30、50、60、100μmol/L) PQQ处理成纤维细胞24 h,使用CCK-8法检测细胞活力,筛选最适PQQ浓度。将成纤维细胞分为对照组、PQQ组、光老化+PQQ组和光老化组。用UVB照射诱导人成纤维
【基金项目】
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南通市卫生健康委员会科研课题(QA2021043); 南通市科技计划项目(MS22022102); 江苏省研究生科研与实践创新计划项目(SJCX21_1456); 国家自然科学基金资助项目(81903246);
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目的:探究吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinine, PQQ)对中波紫外线(ultraviolet B, UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞早衰的影响。方法:采用不同浓度(10、30、50、60、100μmol/L) PQQ处理成纤维细胞24 h,使用CCK-8法检测细胞活力,筛选最适PQQ浓度。将成纤维细胞分为对照组、PQQ组、光老化+PQQ组和光老化组。用UVB照射诱导人成纤维细胞提前衰老模型,后予50μmol/L PQQ处理24 h。采用流式细胞仪检测细胞周期;β-半乳糖苷酶(β-galacsidase, SA-β-Gal)染色观察细胞衰老;Western Blot法检测p16、p21、p53蛋白质在细胞内的表达情况;实时定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)法检测Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen, COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(typeⅢcollagen, COL-Ⅲ)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinases-1, MMP-1)和基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3, MMP-3) mRNA表达水平。结果:与光老化组比较,光老化+PQQ组细胞形态改善,细胞间隙减小,SA-β-Gal阳性表达细胞减少,细胞增殖活性提高,细胞周期阻滞改善,p16、p21和p53蛋白表达减少,COL-Ⅰ、COL-ⅢmRNA表达量增加,MMP-1和MMP-3 mRNA表达降低。结论:PQQ对UVB诱导的人成纤维细胞提前衰老有抑制作用,其可能通过下调衰老相关蛋白p16、p21、p53的水平,调控MMP-1、MMP-3、COL-Ⅰ和COL-Ⅲ的基因表达而发挥光保护作用。
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