【摘 要】
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目的研究SD大鼠结肠肥大细胞浸润、脱颗粒释放神经生长因子(NGF)在大鼠内脏高敏感发生中的作用。方法19只新生SD大鼠在出生第8、10、12天予肠道刺激(直肠内气囊扩张)，建立IBS内脏高敏模型。对照组为19只未予结肠扩张的新生SD大鼠。两组大鼠成年后(6～8周龄时)各取10只通过腹壁撤离反射(AWR)检测大鼠内脏敏感性，通过结肠组织切片肥大细胞染色观察肥大细胞浸润及脱颗粒情况。通过ELISA方法
【机 构】
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200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,青岛市市立医院消化科,安徽医科大学第一附属医
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目的研究SD大鼠结肠肥大细胞浸润、脱颗粒释放神经生长因子(NGF)在大鼠内脏高敏感发生中的作用。
方法19只新生SD大鼠在出生第8、10、12天予肠道刺激(直肠内气囊扩张)，建立IBS内脏高敏模型。对照组为19只未予结肠扩张的新生SD大鼠。两组大鼠成年后(6～8周龄时)各取10只通过腹壁撤离反射(AWR)检测大鼠内脏敏感性，通过结肠组织切片肥大细胞染色观察肥大细胞浸润及脱颗粒情况。通过ELISA方法检测两组其余9只大鼠结肠组织的NGF水平。建立新生期大鼠背根神经节(DRG)神经元原代培养体系，给予神经元100 ng/mL NGF刺激4 d，通过膜片钳技术记录神经元的电生理特性的变化。采用配对t检验比较组间结果。
结果AWR显示，新生期结肠刺激可导致大鼠成年后内脏敏感性明显增加，在20、40、60 mmHg (1 mmHg＝0.133 kPa)扩张压下，对照组与模型组大鼠大鼠的内脏感觉评分分别为(1.00±0.50)分比(1.67±0.50)分、(1.89±0.31)分比(2.89±0.34)分、(2.89±0.33)分比(3.89±0.33)分，差异均有统计学意义(t＝－2.83、－6.00、－6.00，P均<0.05)。肥大细胞染色显示，模型组大鼠肠道肥大细胞浸润明显，且部分肥大细胞呈明显脱颗粒状态。结肠组织ELISA方法检测显示，模型组大鼠肠道NGF水平较对照组大鼠明显增加[(11.07±3.06) pg/mg比(2.38±1.88) pg/mg，t＝－6.93, P<0.05)。原代培养的DRG神经元电生理结果显示，与空白对照组比较，100 ng/mL NGF共培养的神经元动作电位的阈值明显降低[(－18.0±2.1) mV比(－29.0±2.5) mV, t＝12.26，P<0.05)]，动作电位频率明显增加[(5.0±1.4)/800 ms比(12.0±3.2)/800 ms, t＝－8.40, P<0.05)；同时发现神经元电压门控钾电流密度明显降低，以延迟外向钾电流降低为主(279.0±48.0) pA/pF比(203.0±39.0) pA/pF, t＝6.18, P<0.05)。
结论大鼠新生期结肠刺激可导致成年后结肠肥大细胞浸润、脱颗粒释放NGF，引起感觉神经元电生理改变，致内脏高敏感。
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