离体脊髓超薄切片生物活性的评定

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目的

探讨离体脊髓超薄切片的生物活性以及具有生物活性脊髓片的生存时间窗。

方法

选取Wister大鼠(6~7周)24只,用微型切片机制备胸段脊髓横切片(厚400 μm)。脊髓片在自制双聚苯乙烯孵化箱内采用5%O2/5%CO2持续灌注的克-林氏液(36 ℃)中进行孵化,采用正电子放射自显影法(dPAT),测量脊髓组织区域葡萄糖代谢率(MRglc)变化为参考指标,考察离体脊髓片的生物活性及具有生物活性脊髓片的生存时间窗。

结果

在离体后6 h内脊髓组织氟代脱氧葡萄糖([18F]FDG)吸收曲线具有很好的线性拟合(r=0.99),[18F]FDG的相对吸收值即MRglc保持恒定(K=7.49±1.27),缺氧、河豚毒素、高K(50 mmol/L)溶液等能明确诱发出与脊髓神经元的功能改变相关的MRglc变化,K值分别为:-0.09(45 min)、6.17、11.17,表明离体后6 h内脊髓片具有的神经活动依赖性代谢。

结论

脊髓片在离体后6 h内仍保存了脊髓神经元的生理功能以及神经活动依赖性代谢,脊髓横切片(厚400 μm)是进行离体脊髓保护及电生理等实验可利用模型。

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