【摘 要】
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为了评价牛坏死杆菌外膜蛋白43K OMP 的免疫原性,试验利用大肠杆菌原核表达系统对牛坏死杆菌43K OMP基因进行表达,纯化目的蛋白免疫兔,制备牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体,并对
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31572534),国家重点研发计划(2017YFD0502200).
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为了评价牛坏死杆菌外膜蛋白43K OMP 的免疫原性,试验利用大肠杆菌原核表达系统对牛坏死杆菌43K OMP基因进行表达,纯化目的蛋白免疫兔,制备牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体,并对其进行鉴定。对基因序列进行预测分析后,针对大肠杆菌稀有密码子优化合成该基因序列,克隆至pET-32a 原核表达载体上,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达及镍柱进行纯化,获得重组蛋白大小约为59 ku。重组蛋白经Western blotting 鉴定后免疫兔,制备多克隆抗体。Western blot 检测牛坏
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