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将苯巴比妥（PB）经硝化和还原两步化学修饰后，在其苯环上引入活性基团氨基，合成具有半抗原结构特征的对氨基苯巴比妥（pAPB）；用重氮化法将pAPB偶联于载体蛋白BSA和OVA上，合成人工免疫原BSA—pAPB和包被抗原OVA—pAPB。用红外（IR）、紫外（UV）、SDS—PAGE进行鉴定，推算分子结合比：用BSA—pAPB免疫新西兰白兔和SPF雏鸡，间接ELISA测定多克隆抗体（pAb）效价，阻断ELISA鉴定其敏感性，WestGold层析试验和交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明．BSA—pAPB偶联成