【摘 要】
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日的:观察抗原免疫刺激后外周淋巴器官中细胞凋亡的情况.方法:用完全佛氏佐剂免疫B10.A小鼠,21天后解剖,取出腹部淋巴结,制成冰冻切片.采用TUNEL原位染色法,步骤如下:1.制备
【机 构】
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复旦大学医学院组织胚胎学教研室,中国科学院上海细胞生物研究所
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日的:观察抗原免疫刺激后外周淋巴器官中细胞凋亡的情况.方法:用完全佛氏佐剂免疫B10.A小鼠,21天后解剖,取出腹部淋巴结,制成冰冻切片.采用TUNEL原位染色法,步骤如下:1.制备冰切片,过夜;2.用4%多聚甲醛(PBS,pH7.4)固定10分钟,然后PBS洗30分钟;3.用3%H2O2(甲醇稀释)封闭,室温下10分钟,然后PBS洗30遍;4.用0.1%Triton X-100(0.1%柠檬酸钠)在冰上(4℃)作用2分钟 ,然后PBS洗2遍;5.擦干切片,每张加50μl TUNEL反应混合液,置于湿盒中
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