锌指蛋白139对人胃癌细胞株SGC7901增殖及凋亡调控机制探讨

来源 :中华肿瘤防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Iknowyou
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目的探讨抑制锌指蛋白139(zincfinger protein 139,ZNF139)对人胃癌细胞株SGC7901增殖和凋亡的影响及相关机制。方法构建针对ZNF139的siRNA重组质粒并导入SGC7901,逆转录-聚合酶链(RT-PCR)法检测抑制效率;MTT法测定siRNA-ZNF139组、阴性对照组和空白对照组SGC7901细胞活力;流式细胞术观察转染前后细胞周期及凋亡率变化;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Cyclin D1、PCNA、Caspase-3和Bcl-2在各组中表达情况。结果0.8μg/mL siRNA-ZNF139质粒转染SGC7901细胞24、48和72h后细胞凋亡率分别为(4.823±0.685)%、(16.827±3.507)%和(20.107±3.305)%,差异有统计学意义,F=24.59,P=0.001 3。转染48h时空白对照组、阴性对照组和siRNA-ZNF139组G0/G1期细胞比例分别为(51.800±1.552)%、(52.633±0.361)%和(62.100±1.908)%,F=25.52,P=0.001 2;转染72h时G0/G1期细胞比例分别为(51.500±1.153)%、(53.567±1.582)%和(60.100±3.365)%,F=11.97,P=0.008。0.8μg/mL siRNA-ZNF139质粒转染SGC7901细胞48h后,siRNA-ZNF139组ZNF139、Cyclin D1、PCNA和Bcl-2mRNA表达分别为0.126±0.032、0.455±0.082、0.300±0.164和0.110±0.032,明显低于空白对照组的0.613±0.119、0.740±0.098、0.523±0.109和0.311±0.133,Caspase-3mRNA表达(0.230±0.028)明显高于空白对照组(0.089±0.018),P=0.001 9;siRNA-ZNF139组ZNF139、Cyclin D1、PCNA、Bcl-2蛋白表达分别为0.524±0.044 8、0.540±0.052 5、0.535±0.046 1和0.414±0.031,明显低于空白对照组的0.861±0.047、0.750±0.033、0.886±0.058和0.821±0.030,Caspase-3蛋白表达(1.004±0.105)明显高于空白对照组(0.517±0.027),P=0.002 1。结论 ZNF139可通过调节Cyclin D1、PCNA、Caspase-3和Bcl-2基因表达而影响胃癌细胞增殖、凋亡过程。
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