食品微生物快速检测技术研究进展

来源 :食品界 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a18102023
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  食品是人类生存的最主要的物质基础,其安全的重要性直接影响到系到人类的健康。微生物是影响食品安全的关键因素,而食品微生物的种类、数量不仅仅影响到食品的保质期,还是作为食品安全的重要参考依据。国家制定的食品法已经把微生物性健康危害视为食源性危害的主要原因之一。尤其是这段时间以来,能够影响到人类感染的致病菌种类呈现多样化,致病菌微生物已经严重威胁到人类的健康。因此,如何精准的检测和评价食品中的微生物,作为目前社会面临的一个重要的现实问题。本文主要围绕就食品微生物快速检测技术研究进展作简要分析。
  食品微生物快速检测的必要性
  结合目前我国的食品卫生安全现状,近些年食品安全问题发生率呈逐年递增趋势,这很大程度对我国的食品市场正常秩序造成阻碍,同时也给社会稳定带来很多负面影响。参考世界卫生组织(world health organization)的近几年的调查数据来看,发达国家每年接近有30%以上的人患有食源性疾病,而发展中国家则要高达50%,因此食源性疾病最终致死案件频发。具体来讲,食源性疾病主要指的是食物内所受一些化学类物质,或是微生物污染而引起的人类疾病。通过检测可以总结出来一点,食品生产的诸多环节(包括后续的储存、运输、销售)都有微生物污染的可能性。因此,有必要进行全面的微生物检测。
  然而,在具体的实践过程中,目前已经研发推行诸多食品内微生物检测的相关技术方法,通常来讲主要讲这些检测技术运用于食品微生物检测中,是为了对食品内培养基中的微生物数量进行观察计量,最终对食品被微生物的具体污染情况及程度加以观察。但是培养基培育微生物检测方法有很明显的局限性,会需要很长的观察周期,而这也无法与现代社会的食品行业快速发展节奏相匹配,随着目前食品市场的深入发展,也提出对食品微生物检测技术的更高标准。根据目前的发展来说,食品微生物快速检测技术正在不断地发展,在近年来也取得了较大的技术应用进展,譬如研发创新的针对固相细胞、流式细胞计数仪的细菌计数法、立足于PCR的微生物快速检测技术的细菌计数法等。诸如此类的新型技术均作为改进过后的新型微生物快速检测技术。
  食品微生物快速检测技术的研究进展
  立足于细菌计数法的微生物快速检测技术。该类检测技术主要涉及了两类比较常用的方法:其一为流式细胞仪计数法(FCM)、其二为固相细胞计数法(SPC)。其中FCM快速检测技术是基于激光技术基础之上,经过技术完善创新所发展的新型定性结合定量技术,能够运用反射信号对微生物的细胞浓度精准识别,经过检测所得的微生物细胞浓度,相较标准生物细胞浓度,进而有效判定为微生物的状态。FCM检测通常会参考以下几个步骤:
  1.以激光为光源,聚焦激光束,垂直照射检测品流。
  2.受到辐照的细胞会产生荧光或散射光,需要对细胞的具体反射光型仔细观察并准确记录。
  3.依照如下标准分析如上FCM的检测反射光:散射光及细胞体积相关,激发荧光光度与膜表面抗原强度及细胞核浓度相关。经过将所记录的光结果对比相较,最终生成微生物检测报告,以检测出实际的微生物的规模。FCM技术如上文所述基于激光技术基础之上,达到了对微生物检测的灵敏度,进而实现的定量结合定性分析,这是目前研究的关键点,在实际应用中得到了广泛的应用。
  与FCM相对应的是SPC,这种检测方法主要是针对单细胞细菌的快速检测。例如,在展开食品微生物快速检测试验过程中,通过运用邻苯二甲酸原位杂交,从而对食品内存在的特殊微生物有效检测,运用滤膜则能够有效隔离小菌落和其他菌落,也更加方便实现PNA探针及RNA序列直观观察小菌落。该方法可具体检测食品内存在的革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和酵母微生物,能够较传统培养基培养微生物检测方法提高1倍的检测速度。
  立足于电化学原理的微生物快速检测技术。对食品微生物快速检测技术主要基于电化学电阻原理基础之上,能够实现对微生物的精准对比相较,通常将此种技术运用于高水平微生物检测中。这是电化学电阻技术原理的基本内容。通过实际的记录和比较培养基电化学性质的变化,可以确定细菌在培养基中的生存状态和繁殖状况。运用这个方法能够进一步提升微生物检测的效率,具体围绕食品中大肠杆菌、支原体、霉菌、酵母等微生物有着极其有效的检测效果,该方法呈现出不可比拟的重复性高、灵敏度高、快速等优势。
  立足于免疫学的微生物快速检测技术。免疫学技术运用于食品微生物快速检测中,作为新型细菌鉴定类技术,能够在检测过程中有效运用抗体即抗原实现特异性反应,并且基于免疫扩增技术基础之上深入观测菌落。运用免疫学检测技术的优势所在,即能够无需在细菌增多情况下隔离便可实现有效检测。胶体免疫层析法是免疫学技术的标志,它有着极高的灵敏度,可以短时间内观察到金黄色葡萄球菌,并成功检测出食品内沙门氏菌,尤其是在现场检测的环境下,不依赖于特殊的仪器。
  (1)免疫荧光技术:免疫荧光技术主要指的是运用荧光色素,标记抗原抗体之后将完成标记的抗原抗体,或是待测的抗原抗体结合,经过结合的抗原抗体便会在荧光显微镜之下发出荧光,即可完成对应抗原抗体的监测,也就是微生物检测。此种微生物检测方法的流程:结合待测的抗原、抗体,经过对结合后的抗原抗体洗涤分离,将其加入之酶反应底物内,形成酶分解作用,产生底物颜色,结合所分解的底物颜色深浅程度,对样品数量加以分析即可完成微生物量的精准测量,通过运用此种方法具备了较强的特异性及检测灵敏度。
  (2)酶联免疫吸附技术:酶联免疫吸附技术在运用过程中,主要实现放射免疫技术与荧光技术的两两结合,具体检测流程:通过将固相载体与待测抗原抗体结合,之后形成酶分解作用,产生底物颜色,结合所分解的底物颜色深浅程度,对样品数量加以分析即可完成微生物量的精准测量。此种检测方法对微生物的数量能够精准测量,达到较为灵敏的检测反应,并且此种检测方法能够实现针对多微生物的同时检测。主要被运用于对食品污染的检测中,该技术实现对沙门氏菌、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的极好检测成效。
  (3)免疫磁珠技术:免疫磁珠技术在运用时能够实现待检测样品结合磁珠,之后达到磁场作用力下,即可有效分离待检测的微生物物质。通过运用该技术能够有效避免选择性培养基抑制最终检测结果的情况,进而保证了微生物检测的效率。通过实现其他检测技术及免疫磁珠技术的互相融合,能够对检测结果的最终准确性有效提升。
  食品微生物检测技术的发展趋势
  综上通过展开对目前国际间应用于食品微生物检测的技术优势及不足加以分析,基于我国现下的食品微生物检测现状,绝大多数情况下都是以国外快速检测法为主广泛运用,因此对于食品检测的成本投入较高,且缺乏我国应用的统一标准。所以下一步需要对国外先进快速检测技术积极引入的同时,与我国检测技术融合能够研发出契合我国食品微生物检测工作实践情况的快速检测技术,并且还需要进一步建立我国统一的标准检测规范。其次在運用诸多新型快速检测工艺技术的同时,还需要对相关实验的产品质量不断提升,譬如对特殊微生物培养基设备创新优化设计,以此对微生物快速检测技术的特异性及灵敏度有效提升。除此之外对于食品微生物在检测过程中,还需要针对诸多检测技术的多种优缺点熟悉了解,能够真正有效的实现扬长避短,也有效的运用食品微生物检测技术充分发挥自身优势。
  综上所述,食品安全问题一直作为目前社会关注的一个重大现实问题,在很长一段时间里,科学家和专家们正在努力改进或寻求一种更科学、更快速的检测技术,并相信随着科学技术的不断深入发展,会出现更多的新技术和新方法,这样就能够更好地让食品微生物检测技术为人类服务。也相信在不久的未来,通过不断完善规范食品微生物检测技术的标准,从而在我国预防疾病、卫生保健、饮食安全等多方面,做出更大的贡献。
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