【摘 要】
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目的 观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在高糖环境下能否转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),转染成功后目的 基因表达.方法 腺病毒载体介导大鼠BMP-2和
【机 构】
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山东大学,山东大学第二医院骨外一科,山东大学分子生物学实验室
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目的 观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在高糖环境下能否转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),转染成功后目的 基因表达.方法 腺病毒载体介导大鼠BMP-2和IGF-1基因高糖环境下转染Wistar大鼠BMSC,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测基因复制及表达.结果 高糖环境下BMP-2、IGF-1基因各自及共同转染BMSC后,BMSC成活,BMP-2基因表达的产物峰值出现在转染后72 h,BMP-2组灰度值为(1.86±0.06),产物浓度为(58.60±1.61)μg/L,BMP-2+IGF-1组灰度值为(2.37±0.34),产物浓度为(67.61±1.91)μg/L,两组差异均有统计学意义(P＜0.05);IGF-1基因表达的产物峰值出现在转染后48 h,IGF-1组灰度值为(1.48±0.03),产物浓度为(65.17±3.64)μg/L,BMP-2+IGF-1组灰度值为(1.93±0.17),产物浓度为(73.94±4.30)μg/L,两组差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 高糖环境下BMP-2、IGF-1可转染BMSC,且转染后基因表达产物量显著增加.BMP-2、IGF-1基因在基因表达上有协同作用.
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