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通过对紫云英根瘤菌7653R及其Nod-突变株7653R-1侵染根毛试验证实,7653R菌株318×103bp大质粒决定早期结瘤功能,分子杂交结果显示,其nodDABC定位于该质粒上.将7653R菌株的大质粒DNA进行酶切并克隆到表达载体pMP220上,构建lacZ重组子文库,将lacZ重组子文库导入7653R菌株,在加有X-gal和种子浸提物的根瘤菌培养基上选择蓝色菌落.通过Miler试验测定它们的β-半乳糖苷酶活性,获得1株种子浸提物对其有诱导效应的菌株HN18,对该菌株所含的重组质粒pHN