【摘 要】
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目的筛选针对狂犬病毒人源基因工程抗体。方法采集狂犬疫苗免疫人群外周血并分离淋巴细胞,构建抗狂犬病毒Fab噬菌体抗体库,用纯化狂犬病毒CTN株富集筛选,ELISA初步鉴定阳性克隆,测序确定抗体轻重链型别,构建IgG全抗表达载体,转染293T细胞并纯化IgG抗体,采用竞争ELISA、Western Blot和IFA鉴定抗体功能。结果筛选出1株抗狂犬病毒的人源Fab抗体并表达纯化IgG全抗体,IFA结果
【机 构】
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102206 北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室,102206 北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室,102206 北京,中国
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目的筛选针对狂犬病毒人源基因工程抗体。
方法采集狂犬疫苗免疫人群外周血并分离淋巴细胞,构建抗狂犬病毒Fab噬菌体抗体库,用纯化狂犬病毒CTN株富集筛选,ELISA初步鉴定阳性克隆,测序确定抗体轻重链型别,构建IgG全抗表达载体,转染293T细胞并纯化IgG抗体,采用竞争ELISA、Western Blot和IFA鉴定抗体功能。
结果筛选出1株抗狂犬病毒的人源Fab抗体并表达纯化IgG全抗体,IFA结果显示抗体特异针对狂犬病毒,竞争性ELISA,Western Blot结果显示新筛抗体针对磷蛋白。
结论首次通过Fab噬菌体抗体库技术获得针对狂犬病毒磷蛋白人源抗体,为磷蛋白功能机制研究和狂犬病的诊断提供了新的抗体。
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