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扩增猪圆环病毒2型的ORF-2全基因(702 bp),将目的片段与缺陷型腺病毒穿梭质粒pacAd5 CMV K-NpA连接,构建重组穿梭质粒CMV-ORF-2.将穿梭质粒与骨架质粒pacAd5 9.2-100经限制性内切酶PacI线性化后共转染293T细胞,进行细胞内重组.7~15 d后获重组腺病毒rAd5 CMV-ORF-2与对照组重组腺病毒rAd5 CMV-GFP.使用293细胞进行病毒增殖,对增殖稳定的rAd5 CMV-ORF-2进行鉴定;rAd5 CMV-ORF-2 TCID50为107.5/50