【摘 要】
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构建了N端缺失拟南芥CGS基因(D-AtCGS)的原核表达载体,对其进行了原核表达、蛋白纯化和抗血清制备,并利用获得的抗血清对国家大豆改良中心北京分心中心获得的组成型表达、种
【机 构】
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中国科学院东北地理与农业生态研究所,东北林业大学生命科学院,中国农业科学院作物科学研究所国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程,
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构建了N端缺失拟南芥CGS基因(D-AtCGS)的原核表达载体,对其进行了原核表达、蛋白纯化和抗血清制备,并利用获得的抗血清对国家大豆改良中心北京分心中心获得的组成型表达、种子特异性表达的D-AtCGS转基因大豆及转全长AtCGS(F-AtCGS)和D-ATCGS的豆科模式植物百脉根进行了Western blot检测,结果表明:各供试转基因材料的检测信号明显高于野生型对照,最终成功建立了AtCGS转基因大豆的Western blot检测方法,该研究可为AtCGS的表达分析和转基因植物检测提供良好的技术支持。
The prokaryotic expression vector of N-terminal deletion CGS gene of Arabidopsis (D-AtCGS) was constructed, and its prokaryotic expression, protein purification and antiserum were prepared. Using the obtained antiserum, Western blot was used to detect the expression level of D-AtCGS transgenic soybean and F-AtCGS (D-AtCGS) and D-ATCGS. The results showed that: The detection signal of the material was significantly higher than that of the wild type control. Finally, the Western blot method of AtCGS transgenic soybean was established successfully. This study can provide good technical support for the expression analysis of AtCGS and the detection of transgenic plants.
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