熊果酸通过影响Bax 和Bcl-2的表达诱导MCF-7人乳腺癌细胞凋亡

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hujinjinliang
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目的: 探讨中药成分熊果酸(ursolic acid, UA)诱导MCF-7人乳腺癌细胞的凋亡作用,并通过分析UA作用后的MCF-7细胞Bax, Bcl-2, cytochrome c蛋白表达的变化,探讨其诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制. 方法: 采用细胞培养技术,用0, 10, 30和50 μmol/L的UA处理MCF-7细胞24 h,用Ho染细胞,在荧光显微镜下观察凋亡细胞的形态变化. 用0, 20和50 μmol/L的UA处理MCF-7细胞24 h,用PI染细胞,在流式细胞仪上测定细胞周期的变化. 用0和50 μmol/L的UA处理MCF-7细胞24 h,采用荧光免疫细胞化学SABC-Cy3法检测Bax, Bcl-2, cytochrome c蛋白表达,在荧光显微镜下拍照,用QWin图像分析软件测定Bax, Bcl-2, cytochrome c荧光灰度值. 结果: 用0, 10, 30和50 μmol/L 的UA处理MCF-7细胞24 h,随着UA浓度增加,在荧光显微镜下出现凋亡细胞增多,细胞呈现典型的凋亡形态学特征,核质浓集和凋亡小体. 用0, 20和50 μmol/L 的UA处理MCF-7细胞24 h,流式细胞仪检测亚G1峰比例分别为0.05, 0.22, 0.43与对照组5 mL/L DMSO比较,50 μmol/L 的UA 使MCF-7细胞中的Bax灰度(59.3±7.8, 213.6±7.4, P
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