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目的
观察负性共刺激分子B7-H1在食管癌细胞株Eca-109中下调表达后对细胞生物学行为的影响。
方法选取B7-H1阳性的食管癌细胞株Eca-109,通过RNA干扰技术下调B7-H1分子的表达并使用流式细胞术和Western blot对其进行鉴定,采用细胞增殖实验、划痕实验和Transwell侵袭实验探讨B7-H1对食管癌细胞增殖、迁移及侵袭生物学行为的影响。
结果通过RNA干扰技术成功构建B7-H1下调表达的食管癌细胞株Eca109-B7-H1-小干扰RNA(siRNA)及对照组Eca109-NC。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖实验结果显示在培养的6、7、8 d,Eca109-B7-H1-siRNA细胞相对增殖水平(0.61±0.03、0.78±0.04、0.89±0.04)显著低于Eca109-NC组(0.80±0.01、1.00±0.04、1.07±0.09),差异有统计学意义(P<0.01),Eca109-NC组细胞与Eca-109组细胞间差异无统计学意义(P>0.05);划痕实验结果表明,划痕后24 h,RNA干扰组细胞相对迁移距离(126.00±22.63) μm显著短于对照组(339.00±22.11) μm,差异有统计学意义(P<0.05),且对照组与Eca-109细胞组间差异无统计学意义(P>0.05);Transwell侵袭实验结果表明,细胞接种24 h后,干扰组的相对侵袭细胞数量[(20.60±4.61)个]显著少于对照组[(60.40±12.50)个],差异有统计学意义(P<0.01)。
结论B7-H1在食管癌细胞株Eca-109中的下调表达可显著抑制细胞增殖、迁移及侵袭能力,食管癌细胞异常表达B7-H1参与调节其肿瘤生物学行为。