含PR启动子的原核高效表达载体的构建及应用

来源 :生物化学与生物物理进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:laobo999
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组建了一个仅含PR 启动子的原核高效表达载体pRC, 它同时含有cⅠ调控基因、多酶切位点和两个强的转录终止序列. 现已成功地用于表达重组人肿瘤坏死因子α(hTNFα)、重组人白细胞介素3 (hIL3) 和抗溶菌酶(HEL) 抗体Fd 基因, 表达量均占菌体总蛋白的36% 以上. 同时还研究了不同的宿主菌和原核增强子序列等因素对PR 启动子载体表达的影响. 此外, 还比较了分别以PR、PL 或PRPL 作为启动子时表达hTNFα的情况,结果表明, 单用PR 或PL 启动子可获得与使用PRPL 串联启动子一样的高效表达 A prokaryotic expression vector pRC containing only the PR promoter was constructed, which contains both the c Ⅰ regulatory gene, multiple restriction sites and two strong transcription termination sequences. It has been successfully used to express recombinant human tumor necrosis factor  α (hTNF  α), recombinant human interleukin  3 (hIL  3) and anti-lysozyme (HEL) antibody Fd gene expression in both total bacterial cells More than 36% of the protein. The effects of different host bacteria and prokaryotic enhancer sequences on the expression of PR promoter were also studied. In addition, the expression of hTNF-α was also compared with PR, PL or PRPL as promoters respectively. The results showed that the expression of hTNF-α was the same as PRPL tandem promoter
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