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26SrDNAD1／D2区域序列同源性分析是一种常用的酵母分子鉴定方法。D1／D2区域序列的扩增需要酵母染色体DNA作为模板，目前常用的酵母染色体DNA提取方法繁琐耗时且难以进行批量操作，限制了酵母分子鉴定的规模化。研究中建立了一种快速高效的批量酵母染色体DNA提取方法，整个提取过程仅耗时20min，从而使得酵母大规模快速分子鉴定成为可能。用该方法制备的染色体DNA不需要任何后续处理即可作为模板用于扩增酵母的26SrDNAD1／D2区域序列，获得了良好的扩增结果以及扩增产物的测序结果。