小鼠心肌微血管内皮细胞的原代培养及鉴定

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目的建立一种小鼠心肌微血管内皮细胞体外培养体系。方法无菌环境下取出3~4周大小的C57小鼠心脏,并去除左右心房、瓣膜组织和结缔组织,将余下的心肌组织用70%的酒精浸泡15s,PBS清洗干净后滴加少量胎牛血清并尽量剪碎心肌组织,将剪碎后的组织块均匀接种到1%明胶包被的6孔板内,内皮细胞专用培养基培养,倒置显微镜观察细胞生长形态,vWF相关抗原进行免疫荧光鉴定。结果贴壁后的组织块于24小时左右开始长出细胞,大约1周后细胞汇合呈铺路石样。传代后小鼠心肌微血管内皮细胞的生长曲线近似“S”形,第1、2天生长速度缓慢
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