短小芽孢杆菌热稳定环糊精葡萄糖基转移酶粗酶酶学特性研究

来源 :中国粮油学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zwb19831101
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从土壤分离物中筛选到一株环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glucanotransferase,CGTase)产生菌CGT01.16SrDNA序列分析表明该菌与短小芽孢杆菌(Bacillus pumnilus)的同源性为99%.同时根据其生理生化特征,该菌株被鉴定为短小芽孢杆菌(B.pumilus).命名为B.pumilus.CGT01菌株.产生CGTase的最适初始pH为6.5,最适培养温度为37℃.菌株所产CGlke的最适pH值和最适反应温度分别为pH 6.5和60℃,并有较高的热稳定性.60℃条件下保温,酶活基本稳定,半衰期为35 min.酶液中添加1 mmol/L Ca2+能明显提高CGTase的稳定性,60 ℃保温1 h后,剩余酶活仍达80%以上.SDS-PAGE检测表明酶的分子量约为78 ku左右.经高效液相色谱分析表明,CGTase作用于可溶性淀粉后的主要产物为葡萄糖、麦芽糖和β-环糊精,没有检出α和γ型环糊精产物,因此所产环糊精为单一类型,不同于同种属的其他菌株所产CGTase.
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