LOC152742通过TLR4信号通路和炎症反应调控结核分枝杆菌对Ⅱ型肺泡上皮细胞的感染

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目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)LOC152742对结核分枝杆菌感染的人Ⅱ型肺泡上皮细胞炎症反应和Toll样受体4(TLR4)信号通路的影响。方法 在A549细胞中转染LOC152742 siRNA,实验分为对照(Con)组、感染(H37Rv)组、转染对照(H37Rv+si-NC)组和转染(H37Rv+si-LOC152742)组。RT-PCR分析LOC152742表达水平变化,MTT法分析A549细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(cleaved caspase-9)、TLR4、髓样分化因子(MyD88)蛋白表达,ELISA分析细胞上清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。在H37Rv+si-LOC152742组A549细胞中添加TLR4特异性抑制剂TAK242,检测TAK242对炎症反应的影响。结果 与Con组相比,H37Rv组A549细胞凋亡率、LOC152742、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、TLR4和MyD88的表达以及IL-6、IL-1β和TNF-α的含量显著升高(P<0.05),细胞增殖率显著降低(P<0.05);与H37Rv组相比,H37Rv+si-LOC152742组A549细胞凋亡率、LOC152742、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、TLR4和MyD88的表达以及IL-6、IL-1β和TNF-α的含量显著降低(P<0.05),细胞增殖率显著升高(P<0.05);TLR4特异性抑制剂TAK242能够逆转下调LOC152742对结核分枝杆菌感染的A549细胞的影响。结论 H37Rv感染的A549细胞中LOC152742的表达上调,下调LOC152742能够通过抑制TLR4信号通路减轻炎症反应调控结核分枝杆菌对肺泡上皮细胞的感染。
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