嵌合型HCV全长cDNA的构建及体外转录制备感染性RNA的研究

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sunweidong123

【摘要】

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构建HCV la/1b嵌合型全长cDNA克隆,进行体外转录,脂质体法转染HepG2细胞,以RT-PCR法检测HCV正、负链RNA,Western印迹检测HCV蛋白表达.结果表明,细胞在转染后8代(约35d)内,能

【作者】

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吕欣徐志凯薛小平尹文雷迎峰杨敬孙梦宁

【机构】

：

第四军医大学微生物学教研室

【出处】

：

生物技术通讯

【发表日期】

：

2005年2期

【关键词】

：

丙型肝炎病毒嵌合体感染性RNA 体外转录脂质体转染复制机制 HCV chimera infectious RNA in vitro transcr

【基金项目】

：

国家自然科学基金，第四军医大学校科研和教改项目

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构建HCV la/1b嵌合型全长cDNA克隆,进行体外转录,脂质体法转染HepG2细胞,以RT-PCR法检测HCV正、负链RNA,Western印迹检测HCV蛋白表达.结果表明,细胞在转染后8代(约35d)内,能间断检测到HCV正、负链RNA以及相对分子质量约70000的HCV NS3蛋白,证明该HCV嵌合体可以在细胞中复制和表达.本研究表明含有该嵌合型全长cDNA的质粒可以为后续HCV的研究提供大量可重复的性质均一的病毒模板,有助于深入了解HCV的复制机制.

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