【摘 要】
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目的 建立针对高致病性2型猪链球菌(Streptococcus suis 2,SS2)89K毒力岛Ⅳ型分泌系统的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法. 方法 根据国内
【机 构】
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南京医科大学基础医学院,江苏南京210029;南京军区军事医学研究所,江苏南京210002;南京军区军事医学研究所,江苏南京,210002
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目的 建立针对高致病性2型猪链球菌(Streptococcus suis 2,SS2)89K毒力岛Ⅳ型分泌系统的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法. 方法 根据国内流行株特有89K毒力岛编码的Ⅳ型分泌系统(T4SS-89K)的virB4 89K基因保守区域设计并合成LAMP引物,通过优化反应体系和扩增条件建立T4SS-89K快速检测方法,对方法的特异性、敏感性进行评估. 结果 优化的LAMP反应体系具有良好的扩增效率,检测灵敏度为1.53×101拷贝/反应,全部扩增检测可在60 min内完成;建立的LAMP法具有良好的特异性,与不含T4SS-89K的猪链球菌(包括1/2型、1型、3～33型),以及其他常见9种对照菌均不发生特异性扩增,而与1998和2005年疫情现场分离的高致病性SS2均可发生特异性扩增. 结论 建立的LAMP方法具有特异、灵敏,设备要求简单等特点,可用于高致病性SS2快速检测.
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