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【摘要】目的：优选小儿清解颗粒提取工艺。方法：以影响提取工艺加水量、提取时间为考察因素，以提取物中绿原酸含量为指标进行工艺筛选。结果：通过考察不同的加水量、提取时间、提取绿原酸的含量，选择最佳提取工艺为加10倍量的水、提取时间每次2小时、提取二次。结论：实验结果可为小儿清解颗粒提取工艺提供生产依据。
【关键词】小儿清解颗粒；加水量；提取时间；绿原酸
1仪器与试药
LC-10ADvp高效液相色谱仪（岛津），APD-10Avp检测器，SrAdv色谱工作站，JK250超声波清洗器（合肥金尼克机械制造有限公司），对照品绿原酸（批号110753—200413，中国药品生物制品检定所），金银花、连翘、地骨皮 、广藿香、青黛（包煎）、地黄、石膏、白薇等中药材符合《中国药典》2005年版一部[1]标准，甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1工艺筛选。在原工艺[2]基础上，我们对工艺中未提及的影响提取的其它因素进行考察，加水量是影响水提效果的因素之一，为更好保证每批质量，应将水量数据化，我们设计水量为6、8、10、12倍进行提取，以绿原酸含量为指标进行工艺筛选。（以下称取的药材量为处方量的1/12）
2.2提取工艺研究
2.2.1原工艺中广藿香、连翘提挥发油工艺参数不明确，所以对其具体工艺参数进行优选。广藿香、连翘以挥发油类成分为主，为了成分更好地提出，特设计了考察药材的前处理。加水倍量及提取时间3个因素，每个因素3个水平进行比较试验，优选挥发油提取工艺条件。
2.2.1.1预试验不浸泡、冷浸、温浸的选择按处方比例，准确称取广藿香62.5g、连翘62.5g各三份，分别置2500ml圆底烧瓶中，接挥发油提取器，加10倍量水，蒸馏法提取挥发油，结果如下：
不浸泡加水直接蒸馏提取后，滤过，滤液约5倍量，药渣吸液量较大，不浸泡直接蒸馏出油高峰在4小时左右，5～6小时出油完全。
冷浸加水后，先冷浸1小时，再加热蒸馏，则出油高峰在3小时左右，4～5小时出油完全。
温浸加水后，先加热至80℃温浸1小时，再蒸馏提取，则出油高峰在2小时左右，4小时左右出油完全。
故为了节约能源，缩短出油时间，故预试验选择加热至80℃温浸1小时，蒸馏时间5小时。
2.2.1.2加水量的确定
按处方比例，准确称取广藿香62.5g、连翘62.5g各四份，分别置2500ml圆底烧瓶中，上接挥发油提取器，加6倍量、8倍量、10倍量、12倍量水，蒸馏法提取挥发油，结果见表1。
表1
以上结果表明，药材加水量10倍，12倍挥发油得油率差不多，影响不大，为节约能源，故采用加10倍量水蒸馏。
2.3水煎煮工艺优选
原工艺对水煎煮次数，制定了较为详细合理的参数，即为煎煮二次。为进一步细化工艺参数，选择煎煮时间、加水倍量作为考察因素。
2.3.1加水量的优选
按处方比例，准确称取石膏104.15g、金银花62.5g、地骨皮62.5g、青黛（包煎）20.85g、白薇62.5g、地黄62.5g总量375g，共四份，分别置5000ml圆底烧瓶中，分别加6、8、10、12倍量水，石膏先煎煮4～6小时，再加入其余金银花等五味，煎煮2次，每次2小时，滤过。
2.3.2指标性成分的选择
金银花为方中的主要药物之一，主要成分绿原酸，故以绿原酸为指标之一，优选水煎煮工艺最佳参数。
2.3.2.1绿原酸的含量测定
照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VID）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
乙腈－水溶液（15：85）（用磷酸调PH至3.0）作流动相；检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计不低于1000。
对照品溶液的制备精密称取绿原酸适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成1ml含10μg的溶液，即得。（10℃以下保存。）
供试品的制备取各试验提取液1%，减压浓缩至15ml，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50%甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置10ml棕色量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。结果见表2。
表2
以上结果表明，10倍量水与12倍量水绿原酸得率最高，但10倍量与12倍量相差不大，故选择10倍量溶剂，即可降低能源，又可最大提出有效成分。
2.3.3提取时间优选
取处方比例十二分之一药材，即石膏104.15g、金银花62.5g、地骨皮62.5g、青黛（包煎）20.85g、白薇62.5g、地黄62.5g总量375g，共三份，加10倍量水，提取2次，提取时间分别为5小时、4小时、3小时，滤过，合并水提取液。结果见表3。
表3
经过时间上面优选，从绿原酸量来看，最佳提取时间为5小时，但从数据可以看出，提取时间4小时与5小时相差不大，从节省能源的角度可以选择提取4小时。
经过上面的优选，确定提取的最佳工艺为：广藿香、连翘加10倍量水，加热至80℃温浸1小时，水蒸汽蒸馏5小时，接收馏出液。石膏、金银花等6味加10倍量水，石膏先煎煮4～6小时，再加入其余金银花等五味，煎煮2次，每次2小时。
3讨论
因为方中金银花的主要成分以绿原酸[3]为主的酚酸类成分，在长时间高温加热会使其破坏，因此在浓缩药液时尽量降低温度，我们将药液浓缩时使用减压装置，温度控制在70℃以下。采用真空干燥温度60℃。
参考文献
[1]中国药典（一部）[S].北京：化学工业出版社，2005.
[2]卫生部药品标准中药成方制剂第八册WS3-B-1494-93，中华人民共和国卫生部药典委员会，1993. 24.
[3]阴健，郭力弓.中药现代研究与监床应用（1）[M].北京：学苑出版社，1993.
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【关键词】小儿清解颗粒；加水量；提取时间；绿原酸
1仪器与试药
LC-10ADvp高效液相色谱仪（岛津），APD-10Avp检测器，SrAdv色谱工作站，JK250超声波清洗器（合肥金尼克机械制造有限公司），对照品绿原酸（批号110753—200413，中国药品生物制品检定所），金银花、连翘、地骨皮 、广藿香、青黛（包煎）、地黄、石膏、白薇等中药材符合《中国药典》2005年版一部[1]标准，甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1工艺筛选。在原工艺[2]基础上，我们对工艺中未提及的影响提取的其它因素进行考察，加水量是影响水提效果的因素之一，为更好保证每批质量，应将水量数据化，我们设计水量为6、8、10、12倍进行提取，以绿原酸含量为指标进行工艺筛选。（以下称取的药材量为处方量的1/12）
2.2提取工艺研究
2.2.1原工艺中广藿香、连翘提挥发油工艺参数不明确，所以对其具体工艺参数进行优选。广藿香、连翘以挥发油类成分为主，为了成分更好地提出，特设计了考察药材的前处理。加水倍量及提取时间3个因素，每个因素3个水平进行比较试验，优选挥发油提取工艺条件。
2.2.1.1预试验不浸泡、冷浸、温浸的选择按处方比例，准确称取广藿香62.5g、连翘62.5g各三份，分别置2500ml圆底烧瓶中，接挥发油提取器，加10倍量水，蒸馏法提取挥发油，结果如下：
不浸泡加水直接蒸馏提取后，滤过，滤液约5倍量，药渣吸液量较大，不浸泡直接蒸馏出油高峰在4小时左右，5～6小时出油完全。
冷浸加水后，先冷浸1小时，再加热蒸馏，则出油高峰在3小时左右，4～5小时出油完全。
温浸加水后，先加热至80℃温浸1小时，再蒸馏提取，则出油高峰在2小时左右，4小时左右出油完全。
故为了节约能源，缩短出油时间，故预试验选择加热至80℃温浸1小时，蒸馏时间5小时。
2.2.1.2加水量的确定
按处方比例，准确称取广藿香62.5g、连翘62.5g各四份，分别置2500ml圆底烧瓶中，上接挥发油提取器，加6倍量、8倍量、10倍量、12倍量水，蒸馏法提取挥发油，结果见表1。
表1
以上结果表明，药材加水量10倍，12倍挥发油得油率差不多，影响不大，为节约能源，故采用加10倍量水蒸馏。
2.3水煎煮工艺优选
原工艺对水煎煮次数，制定了较为详细合理的参数，即为煎煮二次。为进一步细化工艺参数，选择煎煮时间、加水倍量作为考察因素。
2.3.1加水量的优选
按处方比例，准确称取石膏104.15g、金银花62.5g、地骨皮62.5g、青黛（包煎）20.85g、白薇62.5g、地黄62.5g总量375g，共四份，分别置5000ml圆底烧瓶中，分别加6、8、10、12倍量水，石膏先煎煮4～6小时，再加入其余金银花等五味，煎煮2次，每次2小时，滤过。
2.3.2指标性成分的选择
金银花为方中的主要药物之一，主要成分绿原酸，故以绿原酸为指标之一，优选水煎煮工艺最佳参数。
2.3.2.1绿原酸的含量测定
照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VID）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
乙腈－水溶液（15：85）（用磷酸调PH至3.0）作流动相；检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计不低于1000。
对照品溶液的制备精密称取绿原酸适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成1ml含10μg的溶液，即得。（10℃以下保存。）
供试品的制备取各试验提取液1%，减压浓缩至15ml，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50%甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置10ml棕色量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。结果见表2。
表2
以上结果表明，10倍量水与12倍量水绿原酸得率最高，但10倍量与12倍量相差不大，故选择10倍量溶剂，即可降低能源，又可最大提出有效成分。
2.3.3提取时间优选
取处方比例十二分之一药材，即石膏104.15g、金银花62.5g、地骨皮62.5g、青黛（包煎）20.85g、白薇62.5g、地黄62.5g总量375g，共三份，加10倍量水，提取2次，提取时间分别为5小时、4小时、3小时，滤过，合并水提取液。结果见表3。
表3
经过时间上面优选，从绿原酸量来看，最佳提取时间为5小时，但从数据可以看出，提取时间4小时与5小时相差不大，从节省能源的角度可以选择提取4小时。
经过上面的优选，确定提取的最佳工艺为：广藿香、连翘加10倍量水，加热至80℃温浸1小时，水蒸汽蒸馏5小时，接收馏出液。石膏、金银花等6味加10倍量水，石膏先煎煮4～6小时，再加入其余金银花等五味，煎煮2次，每次2小时。
3讨论
因为方中金银花的主要成分以绿原酸[3]为主的酚酸类成分，在长时间高温加热会使其破坏，因此在浓缩药液时尽量降低温度，我们将药液浓缩时使用减压装置，温度控制在70℃以下。采用真空干燥温度60℃。
参考文献
[1]中国药典（一部）[S].北京：化学工业出版社，2005.
[2]卫生部药品标准中药成方制剂第八册WS3-B-1494-93，中华人民共和国卫生部药典委员会，1993. 24.
[3]阴健，郭力弓.中药现代研究与监床应用（1）[M].北京：学苑出版社，1993.
“本文中所涉及到的图表、公式、注解等请以PDF格式阅读”