清洁级实验动物四种病毒抗体玻片酶免疫检测试剂盒的研制

来源 :微生物学免疫学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:crystal19900224
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本文报道对清洁级实验动物应排除的四种病毒(淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒、小鼠脱脚病病毒、鼠肝炎病毒和仙台病毒)抗体玻片酶免疫(EIA)检测试剂盒的研制。四种病毒感染的细胞和对照细胞经冷丙酮固定于载玻片上制成特异性抗原和对照抗原,此四种病毒的抗血清各10份和SPF小鼠血清20份分别与四种病毒的特异性抗原和对照抗原进行EIA交叉试验,结果显示,抗原只与其相应抗血清发生特异性显色反应,与非特异性小鼠血清和SPF小鼠血清不显色。与HI或ELISA方法比较,通过对112份普通小鼠血清进行测试,结果表明,EIA对仙台病毒抗体的检出率(19.6%)显著高于(<0.005)HI(6.3%),对小鼠脱脚病病毒抗体的检出率(23.3%)与HI(21.4%)无显著性差异(P>0.05)。EIA对淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒和鼠肝炎病毒抗体的检出率分别为1.8%和71.2%,ELISA对两种病毒抗体的检出率分别为1.8%和67.6%,两种方法对两种病毒抗体的检出率无显著性差异(P>0.05)。重复性试验表明两批四种病毒抗体试剂盒对108份小鼠血清两次测定的符合率为96~100%。四种病毒的EIA抗原在-18℃保存12个月或在2-8℃保存3 This article reports the development of an antibody immunohistochemistry (EIA) kit for the detection of four viruses (lymphocytic choriomeningitis virus, mouse ankle virus, mouse hepatitis virus and Sendai virus) that should be excluded from clean-grade laboratory animals. The four virus-infected cells and control cells were fixed on glass slides with cold acetone to make specific antigens and control antigens. The antiserum of each of the four viruses and the serum of SPF mice were respectively distinguished from the four viruses EIA crossover test between the antigen and the control antigen showed that the antigen only had a specific color reaction with its corresponding antiserum and did not develop color with nonspecific mouse serum and SPF mouse serum. Compared with HI or ELISA methods, the results showed that the detection rate of EIA antibody (19.6%) was significantly higher than (<0.005) HI (6.3 %). There was no significant difference (23.3%) between the antibody and the HI (21.4%) in the mice (P> 0.05). The detection rates of EIA against lymphocytic choriomeningitis virus and murine hepatitis virus were 1.8% and 71.2%, respectively, and the detection rates of ELISA against the two virus antibodies were 1.8% and 67.6%, respectively %. There was no significant difference in the detection rate of the two antibodies between the two methods (P> 0.05). Repeatability tests showed that the coincidence rates of two batches of four kinds of virus antibody kit to two determinations of 108 mice serum were 96-100%. The EIA antigens of the four viruses are either stored for 12 months at -18 ° C or 3 for storage at 2-8 ° C
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