基于iTRAQ技术分析脾气虚证大鼠回肠蛋白质的差异

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目的探讨脾气虚证分子生物学特征。方法 12只SD大鼠随机分为正常组和脾气虚组各6只。脾气虚组采用饮食不节加力竭游泳建立脾气虚证模型。分离提取回肠总蛋白,用相对和绝对定量同位素标记(i TRAQ)法检测分析差异表达的蛋白质种类及两组表达比值,用Western blot法验证差异蛋白小肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、肝脂肪酸结合蛋白(L-FABP)、尼曼匹克C1型类似蛋白(NPC1L1)的表达量。结果i TRAQ技术分析发现两组大鼠脂肪消化及吸收相关通路蛋白存在差异,与正常组比较,脾气虚组I-FABP、微粒体甘油三酸酯转移蛋白(MTTP)、L-FABP、NPC1L1、载脂蛋白B(ApoB)、载脂蛋白A4(ApoA4)及单酰甘油酰基转移酶(Mogat 2)7个蛋白均出现了上调(变化倍数﹥1.2)。Western blot法验证差异蛋白IFABP、L-FABP、NPC1L1变化趋势与蛋白质组学结果相一致。结论脾气虚证大鼠回肠组织中I-FABP、MTTP、L-FABP、NPC1L1、ApoB、ApoA4及MGAT7蛋白表达上调。
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