【摘 要】
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目的研究流式分选仪FACSAriaⅡ分选绿色荧光蛋白(GFP)阳性乳腺癌MCF-7细胞株时不同条件选择对分选后细胞的纯度、得率和活性的影响。方法流式分选仪FACSAriaⅡ分别选择70、85
【机 构】
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上海交通大学基础医学院生物化学与分子细胞生物学系公共平台流式实验室
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目的研究流式分选仪FACSAriaⅡ分选绿色荧光蛋白(GFP)阳性乳腺癌MCF-7细胞株时不同条件选择对分选后细胞的纯度、得率和活性的影响。方法流式分选仪FACSAriaⅡ分别选择70、85和100μm三种喷嘴以及4-way purity、purity、yield三种分选模式分选MCF-7细胞的GFP阳性稳转株,计数分选后的细胞并计算分选得率,流式细胞术检测分选细胞的纯度,锥虫蓝染色法检测分选细胞的活性。结果 70、85和100μm三种喷嘴分选GFP阳性细胞纯度均达99%以上,分选得率分别为(37.67±2.05)%、(56.33±2.62)%和(43.33±0.47)%,活细胞比例分别为(88.23±0.97)%、(91.87±1.05)%和(95.33±0.90)%;选择85μm喷嘴,4-way purity、purity和yield三种分选模式分选细胞的得率分别为(51.00±2.45)%、(67.33±2.05)%和(74.00±0.82)%,纯度分别为99.6%、99.3%和96.2%。结论流式分选仪FACSAriaⅡ分选乳腺癌MCF-7细胞GFP阳性稳转株,选择85μm喷嘴以及purity分选模式较合适。
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