米诺环素下调环氧化酶-2抑制砷诱导小胶质细胞活化的实验研究

来源 :现代预防医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wujielele
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目的 探讨米诺环素对砷诱导的小胶质细胞活化和环氧化酶-2(COX-2)表达的影响及可能机制.方法 本实验设置4组:对照组、10 μmol/L NaAsO2组、10μmol/L米诺环素组和10 μmol/L NaAsO2+ 10 μmol/L米诺环素组,各组BV-2小胶质细胞贴壁生长至对数期后,进行24h染毒处理,然后从形态学观察,ELISA法检测干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌,Realtime-PCR分析COX-2 mRNA表达,Western blotting分析COX-2蛋白表达四个方面展开研究.结果 形态学观察发现,与对照组相比,各染毒处理组BV-2小胶质细胞均受到不同程度的激活,而与NaAsO2组相比,NaAsO2+米诺环素组细胞激活状态受到一定抑制.ELISA法检测结果显示:各组INF-γ(F =20.165)、IL-1β(F=10.688)、IL-6(F=11.488)和TNF-α(F=11.641)分泌差异均具有统计学意义(P均<0.001);与NaAsO2组相比,NaAsO2+米诺环素组细胞培养液上清IL-1β、IL-6和TNF-α分泌减少,INF-γ分泌增高(P均<0.05),米诺环素对砷染毒处理的炎性细胞因子分泌有逆向改变作用.Realtime-PCR检测结果显示:各组COX-2 mRNA表达差异具有统计学意义(F=266.427,P<0.001);与NaAsO2组相比,米诺环素下调砷染毒处理的COX-2 mRNA表达(P <0.001).Western blotting光带经分析后,各组COX-2蛋白表达差异具有统计学意义(F =74.785,P<0.001);与NaAsO2组相比,米诺环素减弱砷染毒处理的COX-2蛋白表达(P<0.001).结论 下调COX-2表达可能是米诺环素抑制砷诱导小胶质细胞活化机制的重要环节.
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