H9N2亚型禽流感病毒M1基因在大肠杆菌中的原核表达

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采用RT~PCR技术扩增禽流感病毒M1基因,将M1结构基因克隆于pMDl8一T载体。测序结果表明,插入的片段为M1目的基因。切下目的基因M1,重组到含有谷胱苷肽(GST)的融合蛋白原核表达载体pET一32a(+),获得的重组质粒经PCR、酶切以及序列分析鉴定表明,M1基因插入的位置、大小和读码框架均正确,证明成功构建融合表达载体pET32aM1。构建好的重组质粒经1mmol/LIPTG诱导,在大肠杆菌BI,21中得到大量表达,经过6h表达量达到高峰。融合蛋白M1的分子质量为29.8ku,以包涵体形式存在。
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