【摘 要】
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为将微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum）P23基因在巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）系统中进行表达,利用表达蛋白初步建立隐孢子虫病间接ELISA诊断技术,设计引物从微小隐孢子
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室中国农业科学院动物源性食品安全研究中心
【基金项目】
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国家科技重大专项项目（2012ZX10004220-008）, 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目（2012JB16）, 上海市科技兴农重点攻关项目（沪农科攻字[2005]第3-4号）
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为将微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum）P23基因在巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）系统中进行表达,利用表达蛋白初步建立隐孢子虫病间接ELISA诊断技术,设计引物从微小隐孢子虫基因组DNA中扩增P23基因序列,构建pPIC9K-P23重组质粒,在毕赤酵母中进行表达,用阴离子交换层析柱进行纯化。以重组P23纯化蛋白为抗原建立间接ELISA检测方法,对现场采集的猪血清样品进行检测。SDS-PAGE显示所表达的蛋白大小约为23 kDa。Western blot检测表明该蛋
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