过表达细胞周期相关转录因子1的MGC-803细胞抗原致敏树突状细胞对胃癌细胞的杀伤作用

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目的 观察过表达细胞周期相关转录因子1(E2F-1)的MGC-803稳定株所制成的细胞抗原所引起的树突状细胞(DC)介导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外杀伤胃癌MGC-803细胞的作用.方法 用30μg/L重组人白细胞介素4(rhlL-4)、100 μg/L重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子(rhGM-CSF)、50 μg/L重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)和100 μg/L脂多糖(LPS)联合诱导健康人外周血单个核细胞成为DC,通过形态学及流式细胞仪对DC进行鉴定;实验分E2F-1组、NC组、MGC-803组和DC组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法分别在DC:T为1:5、1:10、1:20、1:40时检测T淋巴细胞的增殖;采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法在T淋巴细胞:MGC-803细胞分别为10:1、20:1、50:1时检测杀伤效果;用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养液中的干扰素(IFN)-γ的含量变化.结果 形态学和流式细胞仪检测结果显示经诱导的DC细胞成熟特征明显,过表达E2F-1组T淋巴细胞增殖能力刺激指数(SI)值(4.42 ±0.23)高于空载体组(2.95±0.53)和空白对照组(3.01±0.68),差异有统计学意义(P<0.05);过表达E2F-1抗原致敏的DC诱导的CTL对胃癌MGC-803细胞株的杀伤率[(65.00±8.24)%]高于DC-CTL组[(45.25±7.89)%]、单纯MGC-803组[(41.83±4.79)%]、空载体组[(31.16±11.96)%]和空白对照组[(33.25±8.38)%],差异有统计学意义(P<0.05);过表达E2F-1抗原组T淋巴细胞分泌IFN-γ的量[(571.03±5.96) ng/L]高于空载体组[(382.85±4.94) ng/L]、MGC-803组[(390.13±7.06) ng/L]和DC组[(356.03±5.36) ng/L],差异有统计学意义(P<0.05).结论 过表达E2F-1的MGC-803抗原致敏的DC在体外可增加T淋巴细胞的增殖,加强T淋巴细胞对MGC-803细胞的杀伤力。

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