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鸭坦布苏病毒E基因主要抗原域的原核表达及单克隆抗体的制备

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 14次 | 上传用户：zzt00007

【摘 要】

：

为制备鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因主要抗原域的单克隆抗体(MAb),本研究经DNAStar软件分析预测E蛋白含有的优势抗原表位区,以DTMUV QD株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增涵盖编码主要优势表位的E基因片段(943 bp~1 287 bp),并将其克隆至表达载体p ET-28a中,转化于大肠杆菌中进行诱导表达。对表达的重组蛋白进行western blot鉴定,将纯化后的重组蛋白

【作 者】

：

孙涛 王超 徐彪 王宏华 邓明俊 郑小龙 岳志芹 

【机 构】

：

山东出入境检验检疫局,泰安出入境检验检疫局,青岛蔚蓝生物制品有限公司

【出 处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2016年04期

【关键词】

：

鸭坦布苏病毒 抗原域 原核表达 单克隆抗体 

【基金项目】

：

国家质检总局科研项目（2013IK038）

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为制备鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因主要抗原域的单克隆抗体(MAb),本研究经DNAStar软件分析预测E蛋白含有的优势抗原表位区,以DTMUV QD株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增涵盖编码主要优势表位的E基因片段(943 bp~1 287 bp),并将其克隆至表达载体p ET-28a中,转化于大肠杆菌中进行诱导表达。对表达的重组蛋白进行western blot鉴定,将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与SP2/0细胞融合,经筛选和鉴定,获得了两株能够稳定分泌抗E蛋白的杂

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