【摘 要】
：
从假单胞菌(Pseudomonas sp.)XZG36中克隆弹性蛋白酶基因,构建原核表达载体,实现其在大肠杆菌(Escherichia coli)中的高效表达,并对表达产物进行酶学性质分析,为微生物发酵生
论文部分内容阅读
从假单胞菌(Pseudomonas sp.)XZG36中克隆弹性蛋白酶基因,构建原核表达载体,实现其在大肠杆菌(Escherichia coli)中的高效表达,并对表达产物进行酶学性质分析,为微生物发酵生产弹性蛋白酶奠定基础.以假单胞菌基因组DNA为模板,PCR扩增弹性蛋白酶基因,并将其开放阅读框(ORF)克隆至融合表达载体pET30a(+)进一步IPTG诱导表达;表达产物经His·Bind亲和层析纯化后对弹性蛋白酶进行酶学性质分析.实验成功克隆了弹性蛋白酶基因,DNA基因片段为1672 bp、编码497个氨基酸残基的多肽,与预计长度相符合;实现了其在E.coli中的高效表达,表达量约占菌体总蛋白的20％;经SDS-PAGE分析,相对分子质量为48 000,与预期的一致;提纯后的表达蛋白SDS-PAGE分析可见单一条带,纯度可达92 ％以上.表达蛋白具有良好活性.
其他文献
提出了游离弹簧反冲洗管内除污方法,试验研究了有、无游离弹簧反冲洗管内除污特性。结果表明,无游离弹簧时,管内反冲洗除污效果与所选用的水质有很大关系,自来水反冲洗除污效
Objective To investigate the mechanism by which remifentanil decreases blood pressure during cardiopulmonary bypass (CPB).Methode Twenty-six ASA Ⅱ or Ⅲ patien
火灾是城市地下空间内令人倍受关注的灾害问题,对火灾发生情形下的人员疏散及救援等问题进行研究,显得非常必要。本研究进行基于风险理论指导下的火灾疏散技术研究,将火灾发
青光眼是全球第二大致盲疾病，眼压增高是其主要危险因素，前列腺素类药物是新型的抗青光眼药物，广泛应用于临床，但其药物反应个体差异大，对其原因尚不明确，遗传变异可能是造成个体间
以温度监控为研究对象,克服了传统监控网络存在布线、灵活性等方面的不足,构建了一种以CC2430芯片为核心的智能供暖节能系统。无线通信在可靠性和抗毁性等多方面都超过了有线
目的:了解我国中西部地区县医院床位规模及影响因素。方法:对中西部地区23个省(区、市)1670个县(县级市)的县医院进行普查,结合随机抽样现场调查。结果:我国中西部地区的县医
目的:对高龄冠状动脉搭桥术(CABG)患者的围术期的护理方法和护理效果进行观察和探讨.方法:选择25例于2012年1月至2013年10月间在我院进行冠状动脉搭桥术治疗的高龄患者资料进
本文首次报道了细长莱蛛Rhitymna macilenta Quan&Liu 2012的雌性,该标本采自海南岛黎母山国家自然保护区,标本保存于湖北大学生命科学学院动物行为与进化中心.细长莱蛛Rhity
本文阐述了笔者对导学案的认识，并结合自己平时的教学实践特别论述了导学案中活动问题设计需要注重的几个方面：活动问题设计重在“导”；活动问题设计重在“细节”；检测问题设计胜
目的：探讨巨细胞病毒（ CMV）和EB病毒（ EBV）共激活对异基因造血干细胞移植患者预后的影响。方法连续纳入2011年12月至2013年8月苏州大学附属第一医院血液科330例异基因造血干细胞移