【摘 要】
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目的 评价万孚疟原虫检测试剂盒(Pf-LDH/Pan-pLDH)对卵形疟原虫的检测效果,并分析原虫密度、疟原虫乳酸脱氢酶(pLDH)浓度和基因多态性等因素对检测结果的影响.方法 按照万孚
【机 构】
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江苏省寄生虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室(无锡 214064)
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目的 评价万孚疟原虫检测试剂盒(Pf-LDH/Pan-pLDH)对卵形疟原虫的检测效果,并分析原虫密度、疟原虫乳酸脱氢酶(pLDH)浓度和基因多态性等因素对检测结果的影响.方法 按照万孚疟原虫检测试剂盒的操作说明书,对经PCR确认的100份卵形疟患者血样进行检测.采用显微镜镜检法计数患者血片的原虫密度,以ELISA法检测血样中的pLDH浓度,以PCR扩增卵形疟原虫LDH(Po-LDH)基因并测序,并分析上述3个因素对检出率的影响.结果 万孚疟原虫检测试剂盒对上述100份卵形疟患者血样的总体检出率为70.0％ (70/100).当原虫密度≤500个/μl时,检出率为27.3％;原虫密度＞ 500个/μl时,检出率为75.0％～ 75.4％.当pLDH浓度较低时(A值≤0.100),检出率为6.7％;pLDH达到一定浓度时(A值＞ 0.100),检出率为95.1％～ 100％.Po-LDH基因序列分析结果显示所有卵形疟样本可分为2种亚型,分别为卵形疟原虫curtisi亚种(P.o.curtisi)和卵形疟原虫wallikeri亚种(P.o.wallikeri).2种亚型的LDH基因同源性为97％,共有24个单核苷酸多态性(SNP),其中3个SNPs为非同义突变,其余均为同义突变.2种亚型的LDH编码氨基酸序列同源性为99％,共有3个氨基酸的差异.万孚疟原虫检测试剂盒对P.o.curtisi的检出率为73.1％(38/52),对P.o.wallikeri拘检出率为66.7％(32/48),两者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 万孚疟原虫检测试剂盒对卵形疟原虫的检测效果优于大部分同类产品,其检出率与原虫密度、pLDH浓度关系密切,与pLDH基因多态性无关.
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