定量检测ProMBP双抗体夹心ELISA方法的建立

来源 :南京医科大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:yhbin2yhbing
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目的:建立定量检测ProMBP的双抗体夹心ELISA方法。方法:采用Protein A亲和层析法纯化自制的抗ProMBP单克隆抗体(mAb),并行SDS-PAGE和Western blot对纯化抗体特性进行鉴定;利用简易过碘酸钠法对抗ProMBP mAb进行标记辣根过氧化物(HRP)后行抗体配对实验;通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度;以纯化的妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)/ProMBP抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收性实验评价ELISA方法,初步对人血清中的ProMB
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