暗纹东方鲀性别相关基因dmrt1的分离、鉴定及表达分析

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为探究暗纹东方鲀dmrt1基因的序列和结构信息,初步研究dmrt1基因在性腺发育和性别分化过程中的作用,我们利用RACE技术成功分离出暗纹东方鲀dmrt1基因cDNA的全长序列,并对其在成鱼不同组织和幼鱼不同发育期性腺组织中的表达进行了鉴定和分析.结果表明:dmrt1基因cD-NA全长1620bp(NCBI登录号:MH218816),编码294个氨基酸,与红鳍东方鲀及星点东方鲀序列相似性最高.dmrt1基因编码的蛋白是一种不稳定的亲水性蛋白,不存在信号肽序列和跨膜区;该蛋白最可能存在于线粒体、细胞质和细胞核;Dmrt1蛋白含有45个磷酸化位点,但不含N(糖基化位点和跨膜保守结构域,二级结构以无规卷曲为主;氨基酸多重序列比对结果显示Dmrt1氨基酸序列的DM结构域在哺乳动物和鱼类中均高度保守,且近C—末端的氨基酸序列也比较保守.荧光定量PCR分析显示dmrt1基因主要在雄鱼中表达,尤其是在精巢中表达量最高,而且dmrt1在幼鱼不同发育期精巢中的表达量呈现出先降低再迅速升高的表达趋势,而相对于精巢而言,卵巢中dmrt仅有微弱表达.研究结果表明,dmrt1可能在雄性性别分化和精巢发育等过程中发挥重要的作用.
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