【摘 要】
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目的 考察地骨皮甲素(kukoamineA,KuA)对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用并对其作用机制进行初步研究,为发现具有抗帕金森病的活性先导化合物提供依据.方法 通过体外建立
【机 构】
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中国人民解放军北部战区总医院药学部,辽宁沈阳110840;沈阳药科大学,辽宁沈阳110016
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目的 考察地骨皮甲素(kukoamineA,KuA)对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用并对其作用机制进行初步研究,为发现具有抗帕金森病的活性先导化合物提供依据.方法 通过体外建立鱼藤酮诱导的帕金森模型,运用MTT、LDH、Hoechst33342染色等方法对KuA体外抗鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤进行初步确认.利用比色法和荧光染色分别考察KuA对超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)及活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位(MMP)的影响.采用Western blotting探讨KuA体外抗鱼藤酮诱导PC 12细胞损伤的作用机制.结果 0.5 μmol/L鱼藤酮可降低PC12细胞存活率,不同浓度KuA可减轻鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤.与模型组相比,KuA可降低细胞内ROS及MDA含量,并提高SOD活性.此外,KuA可提高基质金属蛋白酶(MMP)水平,下调Bax/Bcl-2值、抑制细胞色素C释放以及下调Caspase-3、Caspase-9、a-synuclein的蛋白表达.结论 KuA对鱼藤酮诱导的PC12细胞帕金森病模型具有保护作用,其可能的机制与抑制ROS生成、保护MMP、调控线粒体凋亡途径相关蛋白表达和降低a-synuclein蛋白表达有关.
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