论文部分内容阅读
目的构建人热休克蛋白70（HSP70）的腺病毒表达载体，为进一步研究HSP70对应激状态下细胞的保护作用提供实验基础。方法采用AdEasy系统构建携带外源性HSP70编码基因的重组腺病毒载体pAd-IHSP70，脂质体法转染人胚肾293细胞，包装产生重组腺病毒vAdvHSP。收获病毒进行滴度鉴定，RT—PCR方法检测目的基因在Hela细胞的转录表达。结果PCR、序列测定以及限制性酶切证实HSP70基因正确插入腺病毒表达载体，并在HEK293细胞中包装出重组腺病毒；荧光显微镜下可观察到GFP的表达，收获病毒