【摘 要】
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从黑曲霉N14基因组DNA中扩增出植酸酶phyA基因表达片段,并将其克隆到pMD18-T载体中.以此片段构建了pPIC9K-phyA重组表达载体,目的片段以正确的阅读框架插入到pPIC9K的多克隆
【机 构】
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西南农业大学重庆市蚕桑学重点实验室微生物中心,西南农业大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室,西南农业大学重庆市蚕桑学重点实验室微生物中心
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从黑曲霉N14基因组DNA中扩增出植酸酶phyA基因表达片段,并将其克隆到pMD18-T载体中.以此片段构建了pPIC9K-phyA重组表达载体,目的片段以正确的阅读框架插入到pPIC9K的多克隆位点EcoRⅠ和Not Ⅰ之间.重组表达载体经Xba Ⅰ线性化处理,电击转化毕赤酵母,经G418抗性筛选、酶活性测定、PCR鉴定和SDS-PAGE分析,获得了两株产酶活性分别为143 958.3u/mL发酵液(PP-N14-22)和148 908.3u/mL发酵液(PP-N14-44)的高产工程菌,其酶活性分别是
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