【摘 要】
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重组白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白(TNHH)是治疗用生物制品Ⅰ类新药,具有多种功效,可用于治疗脑卒中。本文旨在优化TNHH工程菌发酵工艺,以实现该工程菌的高密度发酵和目的
【机 构】
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鲁南制药集团股份有限公司哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室,鲁南新时代生物技术有限公司,山东新时代药业有限公司山东省蛋白类药物工程实验室
【基金项目】
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山东省新旧动能转换重大工程课题(2020235)。
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重组白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白(TNHH)是治疗用生物制品Ⅰ类新药,具有多种功效,可用于治疗脑卒中。本文旨在优化TNHH工程菌发酵工艺,以实现该工程菌的高密度发酵和目的蛋白的高效表达。笔者采用摇瓶试验和发酵罐发酵,从培养基碳、氮源配比正交试验入手,对工程菌生长和目的蛋白表达影响较大的单因子条件进行重点考察,如温度、pH、诱导策略、诱导剂和抗生素替代及补料流加方式。通过优化,6批50 L发酵工艺稳定,菌体密度(OD 600)均能达79以上,目的蛋白表达量均在30%以上,质粒丢失率均低于10%。优化后的发
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