【摘 要】
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目的制备抗H7N9神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的嵌合抗体,初步鉴定其活性与功能特点。方法采用基因工程技术,将小鼠杂交瘤技术获得的2株特异性靶向流感病毒A/Anhui/1/2013(H7N9) NA的单克隆抗体VH、VL基因分别克隆入嵌合抗体表达载体VH Express及VL Express中,共转染293T细胞后,表达纯化获得抗H7N9 NA的嵌合抗体,对抗体活性及功能进行鉴定。
【机 构】
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江西省预防医学重点实验室 南昌大学公共卫生学院 330006,江西省预防医学重点实验室 南昌大学公共卫生学院 330006,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 中国国家流感中心,北京 100052,
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目的制备抗H7N9神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的嵌合抗体,初步鉴定其活性与功能特点。
方法采用基因工程技术,将小鼠杂交瘤技术获得的2株特异性靶向流感病毒A/Anhui/1/2013(H7N9) NA的单克隆抗体VH、VL基因分别克隆入嵌合抗体表达载体VH Express及VL Express中,共转染293T细胞后,表达纯化获得抗H7N9 NA的嵌合抗体,对抗体活性及功能进行鉴定。
结果获得了两株特异性抗H7N9亚型流感病毒N9嵌合抗体1E2和3E3,这两株抗体识别抗原部位相似,能抑制NA酶活性及耐药N9神经氨酸酶活性,体外细胞实验中能抑制病毒释放,阻止病毒进一步感染细胞。
结论本研究构建的两株嵌合抗体能特异性识别A/Anhui/1/2013(H7N9)的N9蛋白,KD值达pM,并能抑制N9酶活性,为流感抗体制备以及HAPI禽流感治疗提供了一种可选择的方法。
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