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目的
研究杀伤细胞对人白血病多药耐药(MDR)细胞系的杀伤作用。
方法(1)采用体外药敏试验(MTT法)检测两株MDR细胞系,即K562/VCR和K562/HHT细胞的耐药性。(2)用优选方案诱导效应细胞:50 ng/ml的抗CD3单克隆抗体(CD3McAb)和50 U/ml的IL-2诱导的CD3AK细胞(CD3McAb activated killer cell);400 U/ml的IL-2诱导淋巴因子激活的杀伤细胞(lymphokine activated killer cell,LAK)。(3)以3H-TdR掺入法测定效应细胞的增殖活性。(4)以3H-TdR释放法测定效应细胞对K562细胞及其两个MDR细胞系的杀伤活性。
结果(1) K562/VCR、K562/HHT经冻存-复苏后无药培养1~2个月仍具有高度耐药性。(2)成功地诱导出CD3AK+/-细胞及LAK细胞。(3) CD3AK+细胞的增殖活性较LAK细胞强;CD3AK+细胞对K562细胞的杀伤活性较LAK细胞强,且维持时间较LAK细胞长。(4)CD3AK+细胞对K562/VCR细胞的杀伤活性强于对敏感细胞K562,其对K562/HHT细胞的杀伤活性与其对K562细胞的杀伤活性比较,差异无显著性。LAK细胞对K562/VCR和K562/HHT细胞的杀伤活性比较,均与对K562细胞的杀伤活性差异无显著性。且CD3AK+细胞对K562/VCR细胞的杀伤活性强于LAK细胞。
结论CD3AK+细胞对白血病细胞具有很强的杀伤活性,可望作为较理想的效应细胞用于耐药白血病的过继免疫治疗。