【摘 要】
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背景:腺病毒具有免疫原性,可被机体快速免疫清除,导致目的基因失去表达,这是其作为基因治疗载体的主要缺陷.一些特定的细胞,如角膜上皮细胞和睾丸Sertoli细胞能表达和分泌Fas
【机 构】
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上海第二医科大学附属仁济医院普外科,西安交通大学生命科学院,中国科学院生物细胞研究所
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背景:腺病毒具有免疫原性,可被机体快速免疫清除,导致目的基因失去表达,这是其作为基因治疗载体的主要缺陷.一些特定的细胞,如角膜上皮细胞和睾丸Sertoli细胞能表达和分泌Fas配体(FasL),诱导带有Fas分子的免疫细胞发生凋亡.目的:构建FasL和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)共表达PCA13质粒用于腺病毒的包装,以进一步观察FagL对腺病毒载体的免疫保护作用.方法:利用内源性核糖体进驻位点(IRES),通过感受态细胞的制备和转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳以及限制性内切酶等多种基因工程技术,经多步亚克
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