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目的
探讨Notch信号通路在1-甲基-4-苯基吡啶(MPP＋)诱导的人神经母细胞瘤细胞凋亡中的活性变化及Notch信号通路抑制剂DAPT对凋亡的调控作用。
方法(1)体外培养的SH-SY5Y与不同浓度(0、0.5、1、1.5、2 mmol/L)的MPP＋共同孵育0、24、48、72 h。Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡，Western印迹法检测Notch信号通路相关蛋白Notch-1、Jagged-1及Hes-1的表达。(2)将10 μmol/L的γ-分泌酶抑制剂(DAPT)预处理15 min后的SH-SY5Y细胞与1.5 mmol/L MPP＋共同孵育48 h，Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡，Western印迹法检测Notch-1、Jagged-1、Hes-1蛋白表达的变化。
结果MPP＋以剂量(3.20%±0.19%、10.00%±1.72%、20.60%±3.76%、32.80%±5.12%、46.00%±5.06%，均P<0.05)和时间(2.80%±0.21%、12.30%±1.82%、19.60%±2.89%、35.00%±4.78%，均P<0.05)依赖方式诱导SH-SY5Y细胞凋亡，并显著上调Notch信号通路相关蛋白Notch-1、Jagged-1、Hes-1的表达。DAPT可显著抑制MPP＋诱导的SH-SY5Y细胞凋亡(3.10%±0.21%比35.50%±4.98%、19.20%±2.98%，均P<0.05)以及Notch-1、Jagged-1、Hes-1蛋白的表达。
结论MPP＋诱导SH-SY5Y细胞凋亡中Notch信号通路活化，DAPT可阻断Notch信号通路激活，减少MPP＋诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。