带跨膜片段的α-PEC的分子构建

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通过分子设计构建一段来自人红细胞膜上的血型糖蛋白A(glycophorin A,GPA)中的跨膜片段基因,并连接到藻红蓝蛋白基因片段(pecA)的N端,将融合基因插入到表达载体pET30a进行表达。表达产物以包涵体形式存在,通过优化条件使其溶解,并与藻蓝胆素PCB在裂合并构酶PecE/PecF催化下进行体外重组,通过可逆光致变色活性大小确定包涵体溶解的最佳条件。结果表明,超声后的细胞加入终浓度8mol/L尿素,0.2%Triton X-100和一定量的PecE和PecF,透析时采用含0.2%Triton
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