【摘 要】
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目的:通过分析50Hz电磁场干预骨髓源神经祖细胞向神经细胞分化前后相关神经细胞标志物mRNA表达水平,探讨低频电磁场对骨髓源神经祖细胞诱导分化的作用.方法:利用全骨髓培养法
【机 构】
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暨南大学第一临床医学院,广州,510630;广东省人民医院,广东省医学科学院,广东省老年医学研究所;南方医科大学研究生学院
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目的:通过分析50Hz电磁场干预骨髓源神经祖细胞向神经细胞分化前后相关神经细胞标志物mRNA表达水平,探讨低频电磁场对骨髓源神经祖细胞诱导分化的作用.方法:利用全骨髓培养法获取骨髓间充质干细胞,将第2代骨髓间充质干细胞在无血清神经干细胞培养环境中悬浮诱导,获取骨髓源神经祖细胞.将第3代骨髓源神经祖细胞分为2组贴壁培养:电磁场组与对照组.电磁场组干预方法为正弦波磁场、频率50Hz、强度5mT,60min/d,共15天,对照组置于无磁场干预的同等环境中.骨髓源神经祖细胞诱导后,采用免疫细胞荧光检测巢蛋白(Nestin)与微管蛋白抗体(Tuj-1)的表达变化;采用实时定量基因扩增荧光检测系统(Q-PCR)检测Nestin,唾液酸-神经细胞粘附分子(PSA-NCAM)和β-微管蛋白-Ⅲ(β-Ⅲ tubulin),乙酰胆碱酯酶(ACHE),5-羟色胺(5-HT),γ-氨基丁酸(GABA)mRNA表达水平变化.结果:骨髓间充质干细胞在无血清神经干细胞培养环境中可形成骨髓源神经祖细胞,表达Nestin阳性产物;两组诱导后的神经元样细胞免疫细胞荧光检测Tuj-1均呈阳性表达,Q-PCR结果示Nestin,PSA-NCAM,β-Ⅲ tubulin,ACHE,5-HT,GABA mRNA表达水平与诱导前比较显著下降(P＜0.01),电磁场组β-Ⅲtubulin mRNA表达水平显著高于对照组(P＜0.05).结论:50Hz电磁场可以促进骨髓源神经祖细胞向神经元分化.
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