【摘 要】
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目的 制备模块化HBc-VLPs载体微针疫苗,并分析其特性和免疫效果.方法 通过定向改造hbc的基因序列,制备HBc(A80C)单体蛋白,纯化后的单体蛋白自组装形成HBc-VLPs纳米载体.利用S
【机 构】
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太原师范学院生物系,山西晋中030619;太原师范学院生物系天然生物活性成分创制兽药工程中心,山西晋中030619;太原师范学院生物系,山西晋中030619
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目的 制备模块化HBc-VLPs载体微针疫苗,并分析其特性和免疫效果.方法 通过定向改造hbc的基因序列,制备HBc(A80C)单体蛋白,纯化后的单体蛋白自组装形成HBc-VLPs纳米载体.利用Sulfo-SMCC将含有-NH2的流感病毒模式抗原肽M2e锚定于HBc-VLPs表面的Cys位点,制备M2e-HBc-VLPs模式抗原.以快速溶解材料为基质,将抗原微粒混合于基质中,制备涂层微针疫苗,并进行凝胶穿刺、皮肤穿刺及疫苗释放试验,Western blot分析M2e-HBc单体的抗原性.将剂量分别为50和100 μg/只的微针涂层疫苗经皮内免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清特异性抗体效价,流式细胞术检测小鼠T淋巴细胞变化.结果 HBc (A80C)单体组装形成了粒径约为30 nm的HBc-VLPs球形载体.凝胶、皮肤穿刺试验表明,抗原能够到达表皮层,并在15 min内完成90％以上的释放.偶联M2e抗原能与相应抗体发生特异性结合,疫苗能够有效刺激小鼠产生抗原特异性IgG抗体,并在一定程度上激活机体的细胞免疫,验证了模式疫苗的有效性.结论 具备定点偶联功能的HBc-VLPs载体能够搭载多种抗原模块,形成针对性的疫苗,缩短疫苗在制备、评价等方面所需时间,加快疫苗的研发流程.通过微针进行皮肤免疫,能够实现大规模的快速接种.本研究为HBc-VLPs作为模块化疫苗载体奠定了基础,可促进模块化微针疫苗的研发.
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