【摘 要】
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目的:制备重组小鼠IL-36α 成熟肽,并对其在炎症性肠病(IBD)中的作用进行初步研究.方法:对小鼠IL-36α成熟肽基因进行密码子优化并化学合成,将其插入原核表达载体pET28a(+),
【机 构】
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中国医科大学免疫学教研室,沈阳,110122;辽宁大学生命科学院,沈阳,110036;北部战区总医院北陵院区,沈阳,110031
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目的:制备重组小鼠IL-36α 成熟肽,并对其在炎症性肠病(IBD)中的作用进行初步研究.方法:对小鼠IL-36α成熟肽基因进行密码子优化并化学合成,将其插入原核表达载体pET28a(+),构建pET28a-IL-36α质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,镍亲和层析法纯化制备IL-36α成熟肽;利用Western blot鉴定IL-36α成熟肽,使用制备的重组小鼠IL-36α成熟肽干预DSS诱导的小鼠IBD模型,检测模型小鼠体重、生存率、疾病活动指数、肠管长度及组织病理学等变化情况.结果:经SDS-PAGE和Western blot分析获得纯度高达95％的IL-36α成熟肽.与对照组相比,IL-36α成熟肽处理组IBD小鼠的体重下降减少、生存率增高、疾病活动指数降低、肠管长度及组织病理学得到明显改善.结论:成功制备重组小鼠IL-36α成熟肽,初步证实了IL-36α对小鼠IBD模型的炎症抑制作用,为进一步研究IL-36在炎症性肠病中的免疫调节功能奠定基础.
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