【摘 要】
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目的：初步探索家鸡苹果酸脱氢酶2编码基因MDH2的序列特征、组织表达及原核表达情况。方法：采用克隆技术与测序技术获取家鸡MDH2基因互补脱氧核糖核酸（cDNA）全长，使用多种在线软件对其进行生物信息学分析，利用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）技术检测该基因在不同组织中的表达情况，利用同源重组技术构建pET32a（+）-MDH2表达载体，使用异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达。结果：从新
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金项目（82104346）； 中国中医科学院科技创新工程（CI2021A04012）；
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目的：初步探索家鸡苹果酸脱氢酶2编码基因MDH2的序列特征、组织表达及原核表达情况。方法：采用克隆技术与测序技术获取家鸡MDH2基因互补脱氧核糖核酸（cDNA）全长，使用多种在线软件对其进行生物信息学分析，利用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）技术检测该基因在不同组织中的表达情况，利用同源重组技术构建pET32a（+）-MDH2表达载体，使用异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达。结果：从新鲜家鸡砂囊内壁中成功克隆到MDH2基因，序列长度1120 bp，其开放阅读框（ORF）为1014 bp，编码337个氨基酸；MDH2蛋白相对分子质量为35.95 kD，理论等电点9.17，属于稳定碱性疏水性蛋白。MDH2蛋白含25个磷酸化位点；二级结构主要包括α-螺旋、β-螺旋、无规则卷曲，无信号肽和跨膜结构域。MDH2基因在心、肝、脾、肺、肾、砂囊内壁中都有表达，其中心、肾、砂囊内壁中表达量较高，pET32a（+）-MDH2重组蛋白主要是以包涵体的形式存在。结论：MDH2基因在家鸡体内广泛表达，但其在各组织/器官中表达趋势不同，提示其功能可能具有广泛性与多重性。
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