【摘 要】
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目的研究大鼠肝移植缺血再灌注后Kupffer细胞CD14基因及蛋白的表达,探讨其在再灌注损伤中的作用.方法分离培养大鼠肝移植缺血再灌注后0(对照组)、2、6、12 h(IR组)的Kupffer
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目的研究大鼠肝移植缺血再灌注后Kupffer细胞CD14基因及蛋白的表达,探讨其在再灌注损伤中的作用.方法分离培养大鼠肝移植缺血再灌注后0(对照组)、2、6、12 h(IR组)的Kupffer细胞,用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)检测Kupffer细胞CD14 mRNA的表达,用免疫印迹检测CD14蛋白合成,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定培养上清TNF-α的分泌量.然后在上述时间点的细胞培养液中加入抗CD14抗体(anti-CD14组),观察CD14抗体对TNF-α分泌的影响.结果再灌注后Kupffer细胞CD14 mRNA、蛋白以及TNF-α随观察时间点呈逐步上升趋势(与对照组相比,P＜0.01).应用抗CD14抗体后,TNF-α表达较IR组明显降低(P＜0.01).结论再灌注后Kupffer细胞CD14基因及蛋白的表达明显升高,TNF-α的合成和分泌也明显增强;抗CD14单抗能明显抑制TNF-α的产生;CD14在介导Kupffer细胞激活和肝移植缺血再灌注损伤中可能起重要作用.
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